Isi kandungan:

Bagaimanakah anda mencari kepekatan DNA daripada penyerapan?
Bagaimanakah anda mencari kepekatan DNA daripada penyerapan?

Video: Bagaimanakah anda mencari kepekatan DNA daripada penyerapan?

Video: Bagaimanakah anda mencari kepekatan DNA daripada penyerapan?
Video: Biologi Ternyata Semudah Ini! - Edisi 2 2024, November
Anonim

kepekatan DNA dianggarkan dengan mengukur penyerapan pada 260nm, melaraskan A260 pengukuran untuk kekeruhan (diukur dengan penyerapan pada 320nm), mendarab dengan faktor pencairan, dan menggunakan hubungan bahawa A260 daripada 1.0 = 50µg/ml dsDNA tulen.

Begitu juga, orang bertanya, bagaimana anda mencari kepekatan DNA?

Untuk menentukan kepekatan DNA dalam sampel asal, lakukan pengiraan berikut:

  1. kepekatan dsDNA = 50 μg/mL × OD260 × faktor pencairan.
  2. kepekatan dsDNA = 50 μg/mL × 0.65 × 50.
  3. kepekatan dsDNA = 1.63 mg/mL.

Juga, apakah kepekatan DNA yang baik? A baik kualiti DNA sampel hendaklah mempunyai A260/A280 nisbah 1.7-2.0 dan A260/A230 nisbah lebih besar daripada 1.5, tetapi oleh kerana sensitiviti teknik yang berbeza terhadap bahan cemar ini berbeza-beza, nilai ini hanya boleh diambil sebagai panduan kepada ketulenan sampel anda.

Dengan cara ini, adakah DNA menyerap pada 280 nm?

Nisbah penyerapan pada 260 nm lwn 280 nm ialah biasa digunakan untuk menilai DNA pencemaran larutan protein, kerana protein (khususnya, asid amino aromatik) menyerap cahaya di 280 nm.

Bagaimanakah anda menggunakan NanoDrop untuk kepekatan DNA?

Pada asasnya nanodrop memberi anda pilihan untuk memilih DNA , RNA, Protein. Anda perlu memilih DNA , kemudian letakkan 2 ΜL air (mili Q keutamaan) pilih "Kosongkan" selepas itu letakkan 2 ΜL air lagi untuk mengesahkan sukatannya ialah 0. Kemudian letakkan 2 ΜL sampel anda. Anda akan mendapat ukuran.

Disyorkan: